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Jackson ImmunoResearch干系抗体的具体问题分析(FAQ)

针对Jackson ImmunoResearch抗体的一些具体问题,当今艾好意思捷回归了五点,如下:

1. 西方思路(Western blot)

怎么幸免检测免疫千里淀(IP)抗体的重链?

Jackson ImmunoResearch提供针对IgG轻链的特异性抗体,以幸免检测IP抗体的重链(50 kDa)。

怎么幸免检测免疫千里淀(IP)抗体的轻链?

不错使用针对IgG Fc片断的特异性抗体来幸免检测IP抗体的轻链(25 kDa)。可是,样本归附频频会导致小数降解的重链在25 kDa处产生,必须使用FabuLight™抗体来阻断这些片断的信号。

2. 酶联免疫吸附测定(ELISA)

推选的涂层条款是什么?

为确保透顶涂层,Jackson ImmunoResearch淡薄使用10微克/毫升的卵白质在高pH缓冲液中,举例0.1 M Na2CO3/NaHCO3,pH 9.6。

3. 免疫组织/细胞化学(IHC/ICC)

在小鼠组织/细胞上可视化小鼠源头的一级抗体需要哪些试剂?

在小鼠对小鼠染色中,不错使用单价Fab片断来阻断内源性免疫球卵白的不需要信号。

有哪些试剂不错用来提升荧光探针的光踏实性?

很多交易化的封埋介质含有抗消亡试剂。履行室也不错自行准备含有丙酸丙酯的抗消亡封埋介质。

在聘用Cy2的封埋介质时应该明慧什么?

Cy2与p-苯二胺不兼容,这是一种抗消亡试剂,存在于一些交易封埋介质中,如Vectashield。确保Cy2封埋介质中不含p-苯二胺。

在遥远封埋介质中最踏实的荧光团是什么?

青色素已被证据在塑料封埋介质的非极性环境中具有优厚的亮度和光踏实性。

在聘用多重标记左券的荧光团时应该琢磨什么?

在聘用多重标记的荧光团时,审查仪器的智力(可用的引发波长和放射滤光片)。窄带通滤光片有助于从具有叠加放射光谱的荧光团均分离信号。网上灵验具不错匡助聘用荧光染料组合,并与合适的滤光片匹配。

生效的多重标记还需要使用不彼此交叉响应的二级抗体,分手的一级抗体,或内源性组织免疫球卵白。

4. 流式细胞术

我应该为流式细胞术聘用哪种二级抗身体式?

在免疫测定中使用多克隆二级抗体缀合物频频比平直缀合的一级抗体提供更强的信号,因为每个一级抗体不错蚁合多个二级抗体。

F(ab')2抗体在流式细胞术分析中是理思的聘用,因为Fc受体的存在可能会导致配景,因为它们会蚁合悉数这个词IgG抗体的Fc区域。F(ab')2抗体的蚁合特点与悉数这个词分子疏导。

对于复杂的标记组合,如若但愿将预标记的一级抗体羼杂在单一羼杂物中,FabuLights™(单价Fab抗Fc抗体)相配合适。

在小鼠细胞上可视化小鼠源头的一级抗体需要哪些试剂?

使用平直标记的一级抗体是幸免检测内源性免疫球卵白的最好次序,当一级抗体与履行样原本自归并物种时。

如若需要二级抗体进行检测,不错使用单价Fab片断来阻断内源性免疫球卵白的不需要信号。

什么是同型对照,它怎么使用?

同型对照是一种阴性对照,用于考据一级或二级抗体的特异性蚁合。同型对照与履行抗体属于归并类别或亚类,但不是针顽抗原蓄意的。同型对照不错从履行抗体的宿主物种的肤浅血清中纯化;大要在单克隆抗体的情况下,不错是针对不干系抗原的归并亚类的单克隆抗体。未标记抗体的同型对照是未标记的,标记抗体的对照与履行抗体使用疏导的申报分子(荧光团或生物素)进行标记。

在流式细胞术中了解更多对于同型对照的信息。

在聘用荧光探针时应试虑什么?

在聘用流式细胞术的荧光团时,审查仪器上可用的荧光通说念。在线用具浮浅匡助聘用荧光染料组合。

5. 电子显微镜

各式欺骗推选使用什么大小的金颗粒?

Jackson ImmunoResearch提供4、6、12和18纳米大小的免疫金复合物。对于很多欺骗来说,颗粒大小并不重要,试剂不错互换。

6、12和18纳米大小推选择于透射(TEM)和扫描(SEM)电子显微镜中的多重标记左券。这些复合物经由密度梯度贬责,确保颗粒大小的均匀性。4纳米大小不错用于电子显微镜中的单一标记,但可能包含不均匀的颗粒。

4纳米免疫金复合物提供了最好的组织穿透力,频频更受显豁微镜(LM)的深爱。大尺寸的也合适LM。悉数免疫金试剂皆需要银增强才能用于LM。

应该怎么储存胶体金复合物?

将液态胶体金复合物(6、12和18纳米)储存在-20°C。将冻干金复合物(4纳米)储存在4°C,直到它们重新水化。

何时应在左券中包含银增强?

需要银增强来不雅察显豁微镜下的免疫金染色。请按照Jackson ImmunoResearch的银增强左券操作,或使用交易化试剂。

抗体标记荧光团小鼠试剂发布于:湖北省声明:该文不雅点仅代表作家本东说念主,搜狐号系信息发布平台,搜狐仅提供信息存储空间工作。

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